拟南芥LYSOPL2基因及其油菜同源基因的克隆及功能分析

【摘要】植物油脂的储存形式为三酰甘油(TAG),它是一种人类生活所必需的重要营养物质,也是重要的工业原料和潜在的可再生生物质能源。提高油料作物油脂含量是育种工作者改良作物品质性状的主要目标。而应用分子生物学方法分离油脂合成相关基因、研究植物油脂合成的分子机制显然已成为分子育种的重要方向。单酰甘油酰基转移酶MGAT是花生油脂合成过程中重要的调控因子,MGAT基因在酵母中的过表达可以导致甘油三酯的积累增加。在本研究中我们分别对拟南芥和油菜里MGAT的同源基因LYSOPL2和BnCC5进行了克隆和功能验证分析。本研究结果对于通过基因技术进一步提高油料作物含油量具有潜在应用价值。主要结果如下：1)分别在拟南芥和油菜里克隆了MGAT的同源基因LYSOPL2和BnCC5。2)构建了拟南芥LYSOPL2基因的过表达载体并转化拟南芥,构建了油菜BnCC5基因的RNAi干涉载体、含双35S和自身启动子的过表达载体。3)通过在拟南芥中过表达LYSOPL2基因,发现T3、T4和T5代转基因后代成熟种子的含油量与野生型相比较提高约2.6%,差异达到显著水平；T3代纯合的T-DNA插入突变体与野生型相比较,种子含油量降低4.51%,差异达到极显著水平,T4、T5代纯和的T-DNA插入突变体与野生型相比较,种子含油量降低0.6%,差异不显著。4)利用农杆菌介导转化法将油菜BnCC5基因的RNAi干涉载体、含双35S启动子的过表达载体成功转化到甘蓝型油菜Westar和甲572,获得了转化株。
【作者】王红梅；
【导师】沈金雄；
【作者基本信息】华中农业大学，作物遗传育种，2014，硕士
【关键词】种子油脂；含油量；过表达；RNAi；基因克隆；

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